PCSK9对C57BL/6小鼠肾组织脂质平衡及损伤的作用

摘要

目的评估PCSK9 （proprotein convertase subtilisin kexin type 9）对C57BL/6小鼠肾脏组织脂质平衡的影响以及损伤作用。方法 12周龄的C57BL/6野生型小鼠和系统性敲除PCSK9基因小鼠通过代谢笼收集24 h尿,经心全身灌注,取出肾脏。采用ELISA方法检测尿微量白蛋白、血尿肌酐、血总胆固醇、肾组织内总胆固醇和甘油三酯水平,BODIPY 493/503染色,透射电镜（TEM）观察肾组织内脂质蓄积;PAS染色、TUNNEL染色以及qPCR和Western印迹法评估肾组织损伤及细胞凋亡。结果与C57BL/6野生型对照组相比,PCSK9 KO组肾组织内总胆固醇及甘油三酯水平升高（均P＜0.05）,BODIPY 493/503染色显示肾小球及肾小管细胞内脂质染色明显加深,TEM提示肾小管细胞内脂滴数目显著增多。系统性敲除PCSK9基因小鼠较C57BL/6野生型对照组尿微量白蛋白/尿肌酐升高（P ＜0.05）,Podocin和Nephrin的转录水平下降（均P＜0.05）,TEM可见肾小球内足细胞足突变短、不同程度的融合。与野生型对照组相比,PCSK9 KO组小鼠肾组织内Bax和Cleaved Caspase 3表达升高,Bcl-2表达下降（均P＜0.05）。结论 PCSK9表达下降增加肾组织细胞内脂质蓄积,继而诱导肾固有细胞的损伤和凋亡。