TNF-α促进C57BL小鼠原代肝细胞FAT/CD36表达和脂质积聚

摘要

目的:观察炎症因子TNF-α对C57BL/6小鼠原代肝细胞内脂质积聚和FAT/CD36表达的影响.方法:采用IV型胶原酶原位二步灌流法制备小鼠原代肝细胞，通过收集并检测细胞培养基中白蛋白含量和免疫细胞化学的方法鉴定肝细胞。结果:所培养的原代肝细胞纯度在90%以上，且在第5天分泌的白蛋白最多，可达0.27g/L。与对照组相比，炎症因子TNF-a能显著升高细胞内甘油三酯含量(51.12士6.60μg/mg vs31.08±7.52μg/mg,P<0.05);在软脂酸背景下，TNF-a同样能升高细胞内甘油三酯含量(88.92士11.57μg/mg vs46.94±4.13μg/mg,P<0.05)。油红O染色结果也显示:一与对照组相比，软脂酸、炎症和联合干预组脂质沉积明显增多，且联合干预组最为明显。免疫组化和WesternBlot结果显示:与对照组相比，软脂酸、炎症和联合干预组FAT/CD36蛋白表达增加，且联合干预组增加更为明显。结论:成功建立小鼠原代肝细胞分离与培养方法，炎症反应可能通过上调FAT/CD36蛋白表达促使原代肝细胞脂质聚集。