隐球菌荚膜多糖GXM纯化方法的改良研究

摘要

目的 对采用乙醇和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)特异性沉淀和纯化葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖(GXM)的传统方法进行针对性改良,探索一个过程简单、耗时少、效率高的GXM纯化方法.方法 250 mL的H99和R265增菌液分别以乙醇和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)特异性沉淀得到GXM-CTAB复合物.采用24:1氯仿:异戊醇混合液分离GXM-CTAB复合物,再加入3倍体积的异丙醇沉淀析出GXM.结果 采用GXM改良纯化法从250 mL增菌液中分别获得了约7.8 mg和18 mg的H99GXM和R265GXM,H99GXM和R265GXM获得率(GXM/GXM和GalXM混合多糖)分别为39％(7.8/20)和45％(18/40).此外,传统的GXM整个纯化过程需耗时2周,而改良方法耗时8 d.结论 本研究采用的GXM改良纯化法不仅与传统方法的提取效率相当,并且纯化耗时减少,提取过程更加简单.