新型gc2hsqcse二维核磁共振技术在绿藻硫酸多糖Ls25结构解析中的应用

摘要

目的采用新型gc2hsqcse二维核磁共振技术对绿藻硫酸多糖Ls25进行结构解析。方法对从绿藻中分离纯化得到的硫酸多糖Ls25进行理化性质分析,并通过红外光谱、甲基化分析以及核磁共振1 H NMR、~1H-PRESET、^(13)C NMR、~1H-1 H COSY、~1H-^(13)C HSQC、~1H-^(13)C gc2hsqcse和~1H-^(13)C HMBC对其进行结构表征。对传统HSQC和新型gc2hsqcse核磁共振技术采用相同采集时间、驰豫时间和扫描次数等,gc2hsqcse在脉冲序列中加入宽带反转脉冲。结果硫酸多糖Ls25的分子量为64.2kDa,硫酸基含量为29.7%,其主要由鼠李糖(91.95%)组成,含有少量葡萄糖醛酸和木糖。在核磁共振分析中二维HSQC谱图中信号缺失严重,采用宽带反转脉冲gc2hsqcse,得到了在HSQC谱图中缺失的糖基A、B、C和D等信号。结合甲基化分析及其他一维和二维核磁共振谱图分析,完成糖基信号的全归属,最终确定Ls25的结构特征。结论采用新型gc2hsqcse二维核磁共振测试技术,解决了硫酸多糖在二维HSQC谱图中的信号缺失问题,为硫酸多糖的结构解析带来了新技术新方法。