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犬肾细胞系、人喉表皮癌细胞、非洲绿猴肾细胞混合培养检测常见呼吸道病毒和肠道病毒

         

摘要

目的建立犬肾细胞系(MDCK)、人喉表皮癌细胞(Hep-2)、非洲绿猴肾细胞(Vero)混合培养以分离常见呼吸道病毒和肠道病毒,为临床检测主要呼吸道、肠道病毒提供新方法。方法采用MDCK、Hep-2和Vero制备混合瓶,接种甲型流行性感冒(流感)病毒、乙型流感病毒、腺病毒和肠道病毒71型流行株污染的咽拭子,观察细胞病变效应,以及采用单克隆荧光抗体、RT-PCR和PCR鉴定。结果对应不同病毒,敏感细胞系出现明显的细胞病变效应,荧光抗体检测可见特异的绿色荧光颗粒,PCR产物电泳结果可见不同的目的片段。结论混合细胞瓶一次可以分离培养多种常见呼吸道病毒和肠道病毒,通过后续的特异性检测手段即可检测,比直接检测标本抗原、核酸的检出率高。该方法有利于推动临床病毒性疾病的诊断。

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