β-防御素-2基因沉默对B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫引起的大鼠炎性反应的影响

摘要

目的研究β-防御素-2基因沉默对B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫引起的大鼠炎性反应的影响。方法 SPF级SD大鼠144只,分为单纯B型流感嗜血杆菌结合疫苗接种组（组1）、B型流感嗜血杆菌结合疫苗接种+气管滴入慢病毒Lv-shRNA-rBD-2（组2）、气管滴入慢病毒Lv-shRNA-rBD-2（组3）、空白对照组（组4）,每组以免疫12、24和72 h为时间点,每组每个时间点12只。收集每组大鼠外周血分离血清,ELISA检测TNF-α、IL-1β和IL-10含量。Western印迹检测大鼠肺组织β-防御素-2蛋白表达。组间比较使用t检验。结果通过脂质体转染的方法,成功将病毒重组。在12、24、和72 h时间点,组1大鼠血清中炎性因子TNF-α含量分别为（82.0±8.0）、（155.0±18.2）和（272.0±32.5）pg/mL,分别为高于组4的（55.0±6.2）、（52.0±5.8）和（56.0±4.8）pg/mL,两组比较差异均有统计学意义（t值分别为16.034、12.411和10.530,P值分别为0.043、0.035和0.018）;而组2分别为（66.0±8.2）、（90.0±12.6）和（108.0±13.6）pg/mL,与组1比较差异均有统计学意义（t值分别为12.115、12.830和15.522,P值分别为0.039、0.033和0.012）。各时间点血清中IL-1β和IL-10含量组1高于组4,两组比较差异均有统计学意义（IL-1β,t值分别为18.032、15.824和13.518,P值分别为0.048、0.039和0.021;IL-10,t值分别为15.410、14.294和13.375,P值分别为0.045、0.032和0.013）;而组2低于组1,两组比较差异均有统计学意义（IL-1β,t值分别为19.012、16.991和14.862,P值分别为0.043、0.034和0.027;IL-10,t值分别为15.134、15.264和11.408,P值0.048、0.036和0.024）。疫苗免疫SD大鼠后72 h,大鼠肺组织中8-防御素-2蛋白相对表达量明显上升,组1高于组4,组2低于组1,组间比较差异均有统计学意义（t值分别为10.582和13.250,P值分别为0.035和0.027）。结论β-防御素-2基因沉默可以改善B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫大鼠引起的炎性反应。