天花粉蛋白联合siPD-1促进卵巢癌细胞凋亡及机制研究

摘要

目的:分析天花粉蛋白(TCS)、TCS和siPD-1联合用药对卵巢癌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:将卵巢癌SKOV3细胞接种于6孔板(1×105个/孔),并分为3组,空白对照组:12 h后更换培养液,无任何药物处理,TCS处理组:12 h后加入含不同浓度TCS(20、40、60、80、100μg/ml)的培养基,TCS+siPD-1联合处理组:12 h后加入含不同浓度TCS(20、40、60、80、100μg/ml)和不同终浓度siPD-1(60、80、100、120、150 nmol/L)的培养基,培养至24 h、48 h时收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR及ELISA检测凋亡相关信号表达及酶活性.结果:与空白对照组相比,TCS处理后的SKOV3细胞凋亡率显著提高,且呈时间和剂量依赖性(P<0.05);与TCS处理组相比,TCS+siPD-1处理组细胞凋亡率显著上升(P<0.05).不同浓度TCS处理组、TCS+siPD-1处理组细胞Caspase-3、Caspase-6、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达上升,且呈时间和剂量依赖性(P<0.05),TCS+siPD-1处理组Caspase-3、Caspase-6、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达显著高于TCS处理组(P<0.05).不同浓度TCS处理组、TCS+siPD-1处理组48 h后,细胞Caspase-3酶活性显著上升,且呈剂量依赖性.结论:TCS和siPD-1联用可促进卵巢癌细胞凋亡,其机制可能为通过调节Caspase-3相关凋亡通路级联反应实现的.