PD-L1通过调控PKC-α-NF-κB信号通路延迟脓毒血症中性粒细胞凋亡

摘要

目的:探讨PD-L1对脓毒血症外周血多形核中性粒细胞(PMN)延迟凋亡的调控作用及可能机制.方法:收集12例脓毒血症患者外周血PMN,同时采集15例健康体检者PMN,流式细胞术测定PMN凋亡;Western blot检测PMN中PD-L1表达;另以SPF级成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脓毒血症组、实验组(PD-L1 siRNA),盲肠结扎穿孔法造模,测定PMN凋亡情况,Western blot检测PMN中Cleaved caspase-3、PKC-α及NF-κB水平.结果:与健康体检者相比,脓毒血症患者在6、12 h时PMN凋亡水平显著降低(P<0.05);脓毒血症患者PD-L1水平显著高于健康对照组(P<0.05),且与6、12 h PMN凋亡水平呈显著负相关(r=-0.693,P=0.012;r=-0.685,P=0.014);脓毒血症组、实验组PMN凋亡水平在6、12 h均低于假手术组,与脓毒血症大鼠相比,转染PD-L1 siRNA后大鼠在6、12 h PMN凋亡水平显著增加(P<0.05);与假手术组相比,模型组大鼠PMN内Cleaved caspase-3水平在6、12 h显著下降(P<0.05),转染PD-L1 siRNA后大鼠PMN内Cleaved caspase-3水平在6、12 h显著上升(P<0.05);与假手术组相比,模型组、实验组PMN内PKC-α、磷酸化NF-κB水平增加,转染PD-L1 siRNA后大鼠PMN内PKC-α、磷酸化NF-κB水显著下降(P<0.05).结论:脓毒血症患者体内PMN凋亡延迟,与PD-L1表达呈显著负相关,提示PD-L1可能是调控脓毒血症PMN延迟凋亡的重要分子.在脓毒血症大鼠模型中,沉默PD-L1基因能够改善脓毒血症大鼠PMN的凋亡延迟,其机制可能与抑制脓毒血症大鼠PMN中的PKC-α-NF-κB信号通路激活有关.