AMPK激活通过调控氧化应激修复高糖诱导的人脑微血管内皮细胞损伤

摘要

目的 探究高糖条件下,腺苷酸活化蛋白激酶(adenine monophosphate activated protein kinase,AMPK)调控的氧化应激对血脑屏障通透性的影响.方法 采用人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)作为体外血脑屏障细胞模型,采取如下两种方式处理:①不同浓度(5.5mmol/L或27.5mmol/L)葡萄糖处理HBMEC 24h;②AMPK激动剂氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(4-amino-1H-imida-zole-5-carboxamide,AICAR)预处理2h后,再给予27.5mmol/L葡萄糖处理24h.Western blot及免疫荧光染色检测细胞间血脑屏障相关的闭锁连接蛋白(zonula occludens protein 1,ZO-1)水平,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,透射电镜观察细胞内线粒体超微结构改变.结果 高糖处理后HBMEC细胞ZO-1水平显著降低,ROS水平升高,线粒体结构损伤;AICAR预处理可显著逆转高糖处理引起的HBMEC细胞中ZO-1水平降低、ROS水平升高和线粒体结构损伤.结论 AMPK激活可通过抑制ROS的产生,修复高糖所致HBMEC损伤.