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人骨髓来源多能成体祖细胞与人肝细胞系体外间接共培养向肝样细胞分化的实验研究

         

摘要

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02在体外间接共培养条件下诱导其横向分化为肝细胞的可行性,为其在组织工程学研究和临床医学中的应用奠定基础。方法将分别接种于盖玻片上的ZHJ-MAPCs和人肝细胞系L02共置于直径10 cm培养皿中实现间接共培养。于间接共培养第1、3、5、7天免疫细胞化学鉴定ZHJ-MAPCs的ALB、AFP、CK-18、CK-19等肝细胞特征性表型表达变化情况,并设阳性对照(单独培养的L02细胞)和阴性对照(单独培养未经诱导的ZHJ-MAPCs),计数阳性细胞比率。结果AFP在ZHJ-MAPCs间接共培养第1天即表现为强阳性。ALB在共培养第3天出现较强的阳性,第5天达到高峰。CK-18在培养第5天开始出现阳性。CK-19在各时间点均为阴性着色。阳性对照细胞ALB及CK18有较强的阳性表达, AFP弱阳性表达,CK19阴性表达。阴性对照细胞均为阴性表达。结论与人肝细胞系L02间接共培养能够诱导人骨髓来源的ZHJ-MAPCs向成熟肝样细胞横向分化。

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