睾丸蛋白聚糖1对胆囊癌细胞生长凋亡的影响及机制

摘要

cqvip:目的研究睾丸蛋白聚糖(SPOCK)1对胆囊癌细胞生长、凋亡影响及机制。方法胆囊癌细胞GBC-SD中分别转染SPOCK1 siRNA和siRNA control,记为干扰组和阴性组,同时以不做处理的GBC-SD细胞作为对照组。Realtime PCR和Western印迹法分别测定转染后的各组胆囊癌细胞中SPOCK1的表达水平,噻唑蓝(MTT)测定各组细胞增殖,克隆形成实验测定各组细胞克隆能力,流式细胞术测定各组细胞凋亡,Western印迹测定各组细胞中信号转导与转录因子(STAT)3、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、磷酸化的STAT(p-STAT)3蛋白水平。结果阴性组胆囊癌细胞中的SPOCK1 mRNA和蛋白水平、细胞A值、细胞克隆形成率、凋亡率及STAT3、Cleaved Caspase-3、p-STAT3蛋白水平与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。干扰组较对照组胆囊癌细胞中的SPOCK1 mRNA和蛋白水平明显降低,细胞A值和克隆形成率也明显下降,细胞凋亡率明显升高,细胞内的Cleaved Caspase-3水平明显升高,p-STAT3蛋白水平明显下降(P<0.05)。结论SPOCK1下调可以抑制胆囊癌细胞生长,诱导Caspase-3介导的细胞凋亡,其作用机制可能与抑制STAT3信号通路的激活有关。