骨关节炎模型大鼠血清骨保护素及软骨下骨降钙素基因相关肽、神经生长因子表达及Mankin评分变化

摘要

目的 探讨大鼠膝关节骨关节炎(OA)软骨下骨神经因子表达及血清骨保护素( OPG)水平动态的变化.方法 40只SD大鼠随机分为实验组及对照组,实验组采用切断大鼠右后膝前交叉韧带方法建立OA模型,对照组仅切开关节囊,实验组根据造模至处死时间再次分为2w组,4w组,8w组,分别于术后2w,4w,8w处死,对照组于术后8w处死.采用心脏采血方法收取大鼠血清标本,处死动物后取膝关节标本,肉眼观察膝关节改变,采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测血清OPG浓度值,膝关节标本脱钙后分别行HE染色、软骨下骨降钙素基因相关肽( CGRP)、神经生长因子( NGF)免疫组化染色,比较关节软骨Mankin评分及CGRP、NGF灰度值.结果 大鼠造模后均存活,无死亡及伤口感染,对照组膝关节面光滑,有光泽,实验组膝关节软骨面破坏逐渐加重,2 w组膝关节面完整性开始遭到破坏,呈现颗粒感,表面晦涩、无光泽,关节滑液混浊;4 w组部分大鼠开始出现骨赘,8 w组关节磨损严重,骨赘明显,溃疡面积增大. HE染色显示对照组关节软骨结构清晰,软骨表面光滑、完整,实验组出现软骨细胞簇集现象,排列紊乱,细胞数目减少,后期发生部分区域软骨细胞缺损;血清OPG含量2 w、4 w呈下降趋势,8 w又逐渐上升,CGRP及NGF表达与前趋势相一致,各组间比较存在统计学差异( P<0. 01).结论 采用前交叉韧带切断法可成功建立大鼠OA模型,血清OPG及软骨下骨CGRP、NGF的表达随着OA的进展发生改变,是OA的重要参与因子.