何首乌单体成分对肝组织及细胞损伤的研究

摘要

目的探究何首乌三种单体成分二苯乙烯苷, 大黄素, 儿茶素等对肝组织及细胞损伤的情况。方法利用48只老鼠随机分为二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组、对照组, 每组12只, 二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组按照剂量1 g/kg, 对照组给予相应量生理盐水, 对大鼠连续灌胃28 d。给药过程中, 观察大鼠一般状态。末次给药结束后, 检测血清肝功能相关生化指标、HE染色观察肝组织病理形态学变化、Western blot检测肝组织凋亡相关蛋白表达。利用人正常肝细胞系LO2细胞, 如动物实验一般分为四组。二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组分别采用7个不同浓度培养24 h及48 h, 对照组加入生理盐水培养同样时间。利用CCK8观察细胞增殖情况, 利用PCR检测凋亡相关因子mRNA表达情况。结果喂养28 d后, 与对照组比较, 二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组三组大鼠体重、摄食量、均无显著差异（P＆0.05）, 大黄素组、儿茶素组大鼠肝组织可见病理性肝损伤现象, 肝脏生化指标异常（P＆0.05）, 且凋亡蛋白表达显著增高[Bcl-2:0.450±0.040比0.340±0.030、0.410±0.070, P＆0.05;Caspase-3:0.030±0.000比0.760±0.030、0.270±0.060, P＆0.01;Bax:0.020±0.001比0.440±0.030、0.150±0.040, P＆0.01。];二苯乙烯苷组大鼠肝组织表现正常。正常肝细胞经过处理后, 与对照组比较, 大黄素组、儿茶素组显示二种单体成分呈浓度依赖性、时间依赖性抑制LO2正常肝细胞增殖（P＆0.05）, 且肝细胞凋亡因子mRNA表达显著升高[Bax:0.89±0.12比1.74±0.05、1.29±0.01, P＆0.01;Caspase-3:0.97±0.07比1.21±0.07、1.25±0.01, P＆0.01;Bcl-2:1.39±0.18比0.06±0.06、0.56±0.11, P＆0.01。];二苯乙烯苷组细胞与对照组相比, 生存率无显著差异（P＆0.05）, 肝细胞凋亡因子mRNA表达显著降低（P＆0.05）。结论何首乌的二苯乙烯苷成分未见明显肝损伤, 大黄素、儿茶素在体内外实验中均显示出肝组织及肝细胞损伤。