转基因阿尔茨海默病小鼠tau蛋白的病理变化

摘要

目的对APP/tau/PS1阿尔茨海默病（AD）转基因小鼠基因型进行鉴定,并研究在其病程进展中tau蛋白的病理变化。方法根据PS1、APP、tau基因序列设计特异性引物,PCR扩增对三转基因AD小鼠的基因型进行鉴定;免疫组化法对2、4、8个月龄小鼠大脑海马区tau蛋白表达进行检测;Western blot检测随着月龄增长小鼠海马组织的tau蛋白及其不同位点磷酸化水平。结果三转基因小鼠基因组PCR扩增获得片段分别为960 b p、530 bp和400 bp,与APP、PS1、tau的预期条带大小相符;免疫组化检测发现,8月龄小鼠海马CA3区tau蛋白表达的阳性区域增加;Western blot检测发现,三转基因小鼠海马区tau蛋白及其ps262、ps404、ps202位点磷酸化水平均较正常野生型小鼠升高（P＜0.01）,且随月龄增长,8、12个月龄小鼠tau蛋白表达较2个月龄均增高（P＜0.01）;Ps404及Ps202位点的磷酸化水平自2个月龄开始就高于野生型（P＜0.01）,8个月龄时表达较2个月龄再次出现升高（P＜0.01）,而Ps262位点的磷酸化水平直到12个月龄才较野生型出现显著性变化（P＜0.01）。结论三转基因小鼠能够稳定的遗传并表达APP/tau/PS,此三转基因动物能很好地模拟AD病tau蛋白的病理特征;tau蛋白及各位点磷酸化水平增高的时间并不一致,8个月龄可能是一个关键的时间点,这将为今后应用此动物模型进行的的病理及靶向治疗药物研究提供科研参考。