姜黄素介导光动力治疗对宫颈癌H8细胞的作用研究

摘要

目的探讨姜黄素介导光动力疗法（PDT）治疗老年宫颈癌抗肿瘤的作用机制。方法噻唑蓝（MTT）法评价姜黄素介导PDT在不同药物浓度、不同光照剂量下对宫颈癌H8细胞增殖的影响,并筛选出最佳作用参数。观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率。实时荧光转录聚合酶链反应（RT-PCR）法分析H8细胞在姜黄素-PDT治疗前后对凋亡抑制基因Bcl-2、P53、Survivin表达的影响。选择人宫颈癌H8细胞系建立裸鼠宫颈癌移植瘤模型,分为对照组、单纯激光照射组、单纯姜黄素组、姜黄素-PDT治疗组（每组10只）。通过苏木精-伊红常规染色（HE）观察姜黄素-PDT体内杀伤效应,免疫组化法检测PDT治疗前后Bcl-2蛋白表达的影响。结果姜黄素5μmol/L和蓝光照射剂量100 J/cm~2时,姜黄素-PDT对H8细胞增殖具有明显抑制作用,并可诱导凋亡,且呈浓度和光剂量依赖效应。在光学显微镜下可见典型凋亡形态改变,核染色质凝集、核固缩、核碎裂、凋亡小体形成。PDT组总凋亡率为（47.21±4.11）%,高于对照组（1.71±0.16）%,差异有统计学意义（P＜0.01）。姜黄素-PDT可抑制Bcl-2、P53、Survivin基因的mRNA表达。裸鼠移植瘤PDT组HE染色可观察到受激光照射的皮下肿瘤组织区域坏死。姜黄素-PDT可抑制移植瘤组织的Bcl-2的蛋白表达（P＜0.01）。结论姜黄素-PDT在体内、体外对宫颈癌H8细胞均具有杀伤效应,此作用与促进肿瘤细胞凋亡、抑制Bcl-2基因表达有关。