lncRNA NEAT1调控肝癌干细胞扩增及自我更新的机制研究

摘要

目的 探讨lncRNA NEAT1对肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)扩增及自我更新能力的调控作用及机制.方法 培养人肝癌细胞系HCCLM3,利用低黏附成球培养富集LCSCs,qRT-PCR检测LCSCs和HCCLM3中NEAT1表达差异;过表达NEAT1慢病毒感染LCSCs,qRT-PCR检测感染效率;流式细胞术、克隆形成实验、细胞成球实验分别检测过表达NEAT1对LCSCs的扩增、克隆形成及球体形成能力;Western blotting检测Hippo信号通路关键分子LATS1和YAP蛋白磷酸化水平.结果 LCSCs中NEAT1表达水平显著高于HCCLM3细胞(P<0.05);感染过表达NEAT1慢病毒的LCSCs中NEAT1表达水平显著高于对照感染(P<0.001),过表达NEAT1模型构建成功;过表达NEAT1使EpCAM+和CD133+的LCSCs细胞亚群比例明显增多(P<0.05);过表达NEAT1促进细胞成球能力和克隆形成能力(P<0.05);过表达NEAT1降低YAP和LATS1蛋白磷酸化水平(P<0.01).结论 lncRNA NEAT1在LCSCs中高表达,过表达NEAT1促进LCSCs的扩增与自我更新功能,可能通过活化Hippo信号通路来实现.