长链非编码RNA叉头框蛋白C1基因启动子上游转录体通过Janus激酶信号对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

摘要

目的观察长链非编码RNA（lncRNA）叉头框蛋白C1（FOXC1）基因启动子上游转录体（FOXCUT）调控JAK信号在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测lncRNA FOXCUT在乳腺癌细胞株（MCF-7和MDA-MB-231）和人正常乳腺上皮细胞（MCF-10A）中的表达。体外干扰lncRNA-FOXCUT在乳腺癌细胞MCF-7中表达,利用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、伤口愈合法和细胞侵袭实验检测lncRNA FOXCUT对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。同时,用qRT-PCR和蛋白质印迹法（Western blot）检测B细胞淋巴瘤2（bcl-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和Janus激酶1（JAK1）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）的表达。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK-q检验。结果 lncRNA FOXCUT在乳腺癌细胞MCF-7（1.567±0.270,t=5.086,P＆0.01）和MDA-MB-231（1.513±0.387,t=3.533,P＆0.01）中表达明显高于MCF-10A细胞（1.004±0.193）,差异有统计学意义。siRNA-FOXCUT组细胞增殖活力明显低于NC组（48 h时0.790±0.068比0.991±0.165,t=2.516,P＆0.05;72 h时0.928±0.135比1.500±0.311,t=3.775,P＆0.01）,差异有统计学意义。同时,siRNA-FOXCUT组MCF-7细胞的迁移率[（30.163±4.133）%比（79.330±4.952）%,t=13.200,P＆0.01]和侵袭[（101.000±13.115）个比（244.667±18.771）个,t=10.870,P＆0.01]能力均低于NC组,差异有统计学意义。siRNA-FOXCUT组细胞中bcl-2（0.565±0.058比1.075±0.242,t=3.555,P＆0.01）和MMP-9（0.527±0.138比0.982±0.172,t=3.574,P＆0.01）在mRNA和蛋白水平均低于NC组,同时p-JAK1（0.185±0.031比1.095±0.134,t=11.460,P＆0.01）和p-STAT3（0.298±0.029比0.948±0.235,t=4.755,P＆0.01）蛋白表达低于NC组,差异有统计学意义。结论 lncRNA FOXCUT可能通过JAK1/STAT3途径参与调控乳腺癌的增殖、迁移和侵袭。