前列腺癌相关转录物6在肝癌患者血清中的表达及干扰其表达对肝癌细胞生物学功能的影响

摘要

目的 观察前列腺癌相关转录物6（PCAT6）在肝癌患者血清中的表达及其表达对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 定量聚合酶链反应（qPCR）法检测2017年6月至2019年6月新乡医学院第一附属医院收治的64例肝癌患者血清和正常肝细胞THLE-3、肝癌Hep3B、HepG2细胞株中长链非编码RNA（lncRNA） PCAT6水平；将肝癌Hep3B细胞随机分为空白对照组（NC组）、阴性空载体转染组照（si-con组）和lncRNA PCAT6沉默组（si-PCAT6组）,通过蛋白质印迹法（Western blot）检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved Caspase-3）、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达；通过噻唑蓝（MTT）检测NC组、si-con组和si-PCAT6组细胞增殖；流式细胞术检测3组细胞凋亡率；Transwell小室法检测3组细胞迁移和侵袭。应用SPSS 22.0统计软件分析。结果 中或高分化患者血清lncRNA PCAT6高表达（60.94%）多于低分化程度患者（6.25%,χ2＝22.968,P＆0.01）,差异有统计学意义,T分期Ⅱ～Ⅳ患者血清lncRNA PCAT6高表达占比（57.81）多于Ⅰ期患者（9.38%,χ2＝8.529,P＆0.01）,差异有统计学意义；Hep3B细胞（3.72±0.67）和HepG2细胞（3.38±0.53）中lncRNA PCAT6表达高于THLE-3（1.03±0.14,t＝9.322、8.144,P＆0.05）,差异有统计学意义。si-PCAT6组lncRNA PCAT6表达（0.21±0.11）显著低于si-con组（0.96±0.15,t＝9.915,P＆0.05）,24、48、72 h细胞活力显著降低（t＝3.280、6.144、6.373,P＆0.05）,差异有统计学意义。Western blot检测si-PCAT6组cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白、p-PI3K和p-Akt表达表达显著增加（t＝11.408、14.628、8.683、9.585,P＆0.01）,差异有统计学意义,MMP-2和MMP-9蛋白表达减少（t＝10.568、10.814,P＆0.01）,差异有统计学意义；流式细胞术检测Hep3B细胞凋亡率显著增高（t＝21.075,P＆0.01）,差异有统计学意义；Transwell细胞迁移和侵袭显著降低（t＝12.816、12.707,P＆0.01）,差异有统计学意义。结论 HCC患者血清中lncRNA PCAT6处于高表达状态,与HCC分化程度、T分期有关,沉默lncRNA PCAT6可抑制其生物学行为,抑制Akt信号通路活化是其作用机制。