从腰椎弓板和棘突分离培养人骨髓间充质干细胞的研究

摘要

目的 探讨从人腰椎弓板和棘突分离培养人骨髓间充质干细胞（hMSCs）的可行性。方法 采用密度梯度离心法,从3例人腰椎弓板和棘突中分离和培养hMSCs,并以1例从髂骨内分离的hMSCs作为对照,观察hMSCs的形态和传代能力,以流式细胞仪检测其表面标记,采用不同的诱导培养基研究并比较其向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化的能力。应用Stata 10.0统计软件进行分析。结果 在人腰椎弓板和棘突中分离的hMSCs呈现典型间充质干细胞的形态,第6代和第2代细胞之间的老化细胞数比较差异无统计学意义（6.500±1.384比6.500±1.258,t＝0.000,P＆0.05）,经诱导可向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。其向成骨细胞分化时的茜素红染色阳性面积像素值显著低于对照hMSCs（32.658±3.14比61.362±8.952,t＝6.674,P＆0.01）；在成脂肪细胞分化时,单位面积的油红染色阳性细胞数显著多于对照hMSCs（27.250±2.493比7.750±1.753,t＝18.100,P＆0.01）；在三维培养下形成的肥大软骨细胞数I-hMSCs和L-hMSCs比较差异无统计学意义（18.833±3.933比19.500±5.252,t＝0.227,P＆0.05）。结论 从人的腰椎弓板和棘突可以分离hMSCs,其细胞特征和髂骨来源的hMSCs相同。在hMSCs的成骨分化和成脂肪分化之间存在反向关联。