呼吸道合胞病毒感染滴度测定方法的建立与比较

摘要

目的建立稳定的呼吸道合胞病毒（RSV）感染滴度测定的实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative PCR,Q-PCR）检测方法和酶免疫斑点法（Enzyme Immunospots,EIS）,并与半数定量方法（50%tissue culture infectious doses,TCID50）进行比较。方法分别采用Q-PCR、EIS和TCID50分析RSV感染的细胞和RSV攻毒后小鼠肺脏标本中的病毒滴度。结果RSV感染细胞的上清中,三种分析方法检测的病毒滴度值之比为:Q-PCR和EIS（pfu）的比约为10:1,EIS（pfu）和TCID50（TCID50换算成pfu）比约为10:1;RSV攻毒后小鼠肺脏标本中,三种分析方法检测的病毒滴度值之比为,Q-PCR和EIS（pfu）比约为1000:1,EIS（pfu）和TCID50（TCID50换算成pfu）比约为5:1。结论成功建立了RSV感染滴度测定的Q-PCR和EIS分析方法,通过与TCID50方法的比较分析,我们认为EIS法分析RSV滴度具有成本低和较高的灵敏度,有较好的应用前景。