胎儿细胞及游离DNA穿越胎盘的实验研究

摘要

目的 从胎盘组织中寻找胎儿细胞及其游离DNA穿越胎盘屏障的实验室证据，为利用孕妇外周血进行无创性产前基因诊断提供实验依据。方法 分娩胎盘组织22份(男婴的12份，女婴的10份)，切片，平行分为2组。一组HE染色，光镜观察绒毛中胎儿细胞的分布；另一组用Dig-碱性磷酸酶标记男性性别特异性标记物SRY(sex determining region)基因扩增片断制成探针，通过原位杂交鉴定胎盘绒毛内特别是绒毛间隙是否存在相应的游离DNA。阳性对照由男性外周血有核细胞涂片经原位杂交提供。结果 HE染色光镜观察，22例胎盘组织切片可见胎儿细胞有穿越绒毛毛细血管内皮和滋养层基膜的现象；胎盘组织原位杂交结果显示：分娩男婴的12份胎盘切片的绒毛毛细血管腔内、绒毛滋养层基膜边缘、以及绒毛间隙，可见阳性信号；分娩女婴的10份胎盘切片均无阳性信号出现；阳性对照涂片杂交后可见清晰阳性信号。结论 胎盘组织切片HE染色、镜检观察胎儿细胞分布，结合原位杂交技术鉴定绒毛内、绒毛问隙游离核酸的性质，可以初步反映胎儿微量遗传物质穿越胎盘进入母亲血液循环的过程。