蜗牛酶中一种人参皂苷Rb1水解酶的分离纯化

摘要

通过DEAE-Sepharose离子交换分段层析,DEAE-Sepharose离子交换梯度层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析三种方法的联用从中华白玉蜗牛消化酶中分离出一种人参皂苷Rb1水解酶.分离后该酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带.应用SDS-PAGE和凝胶过滤层析对分子量的测定,提示该酶是由4个分子量为110～115 kD的相同亚基组成的同源四聚体.Rb1为底物的动力学参数Km和Vmax分别为0.790 mmol/L和10.192μmol/min/mg.该酶对人参皂苷Rb1糖键进行有选择的水解,可水解人参皂苷Rb1C20位的一个糖苷键生成人参皂苷Rd.