杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基STT3a功能结构域的克隆与表达分析

摘要

为了研究STT3a基因在杜氏盐藻耐盐及鞭毛再生方面的作用,根据衣藻、拟南芥等STT3a蛋白的氨基酸高度保守序列VCVFTA、DVDYVL设计一对简并引物,采用RT-PCR及3'RACE的方法扩增杜氏盐藻STT3a蛋白功能结构域的cDNA序列.序列分析显示克隆的cDNA全长1 650 bp,具有一定保守性,与衣藻、拟南芥和人的相似性分别为48%、50%和46%.实时荧光定量PCR结果显示杜氏盐藻STT3a mRNA水平随着盐浓度的升高而逐渐增加,其水平在3.5mol/LNaCl浓度时比在1.5 mol/LNaCl浓度时升高了11倍(P＜0.01).另外,与没有脱鞭毛的杜氏盐藻相比,STT3a mRNA在鞭毛再生过程中持续高表达.本研究显示杜氏盐藻STT3a基因的高表达可以增强其盐适应和鞭毛再生能力.