糖基转移酶-2基因silD在大肠埃希菌中的克隆与表达

摘要

从伊纽小单孢菌(Micromonospora inyoensis)扩增参与西索米星生物合成的糖基转移酶基因silD(1181bp),并分别将其克隆到pUC18和表达载体pET-30a上.其开放性阅读框长1173bp,编码含390aa(43.04ku)的多肽链,在大肠埃希菌BL21(DE3)::pET-silD中实现表达.基因silD的碱基序列与gntD(来自M.echinospora)的碱基序列的同源性高达94%.预测的SilD蛋白序列与GntD的同源性为98%.这是继从依纽小单孢菌克隆参与生物合成西索米星的抗性基因srml(AY661430)、西索米星2-脱氧蟹肌醇合成酶基因sisB(DQ250993)和糖基转移酶基因sisZ(DQ250994)后,克隆到的又一新基因.该基因在GenBank的接受号为DQ250992.基因silD的克隆和表达为进一步研究其生物学功能奠定了基础.