大鼠破骨细胞的诱导及其酸敏感离子通道的表达

摘要

目的:检测酸敏感离子通道(ASICs)在大鼠破骨细胞中的表达情况,探讨其在破骨细胞中的作用.方法:采用1,25-(OH)2D3诱导大鼠骨髓单核细胞分化的破骨细胞.RT-PCR扩增ASICs基因;免疫印迹检测ASICs转录水平;免疫荧光细胞化学方法观察ASICs基因在破骨细胞中的表达和分布.结果:诱导5d后可见抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)阳性多核细胞出现,大鼠破骨细胞在mRNA和蛋白水平均可检测到ASIC1、 ASIC2和ASIC3基因的表达产物.免疫荧光细胞化学显示ASIC1和ASIC2蛋白在细胞膜中有较强的表达,而ASIC3主要定位于细胞质中,少量定位于细胞膜上.结论:大鼠骨髓单核细胞可诱导分化成破骨细胞,能表达ASICs.