微小RNA-18a-3p靶向调控HEPN1及对骨肉瘤细胞迁移侵袭的影响

摘要

cqvip:目的探讨微小RNA-18a-3p(miR-18a-3p)对肝细胞癌下调蛋白1(HEPN1)的靶向调控作用及对骨肉瘤(OS)细胞侵袭迁移的影响。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GEO数据库中下载基因表达谱OS样本数据集GSE65071的series matrix数据,分析OS患者和健康对照的血浆miR-18a-3p水平;采用实时定量PCR检测OS细胞MG63和成骨细胞hFOB 1.19的miR-18a-3p和HEPN1 mRNA水平,Western blotting检测HEPN1蛋白水平;脂质体介导miR-18a-3p抑制物转染MG63细胞(Inhibitor组),同时设NC组(转染阴性对照序列)和对照组(仅予脂质体处理而未行转染),活细胞计数(CCK-8)法、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数以评估增殖和迁移侵袭能力,构建pmirGLO载体并借助双荧光素酶报告检测系统验证miR-18a-3p与HEPN1间的靶向关系。结果GSE65071数据集显示,20例OS患者的血浆miR-18a-3p水平为7.262±0.494,高于15例健康对照的6.005±0.081(P0.05)。与对照组和NC组相比,Inhibitor组转染后24 h的增殖活力有降低趋势(P>0.05),而转染48~96 h的增殖活力降低(P0.05)。结论miR-18a-3p在OS中高表达且发挥促癌的作用,下调其表达可抑制OS细胞的增殖和迁移侵袭能力,可能与靶向HEPN1有关,miR-18a-3p/HEPN1轴有可能成为OS治疗的潜在靶点。