高分子/酶层层自组装平板膜固定化酶研究

摘要

采用层层自组装方法,通过静电作用,制备层层自组装平板薄膜应用于固定化酶。首先,在荷负电的磺化聚醚砜（SPES）基膜上组装荷正电的聚（二烯丙基二甲基氯化铵）（PDDA）,实现第一层组装;进而利用静电吸附作用在PDDA层上组装荷负电的α-葡萄糖转苷酶（αG）,得到固定化酶薄膜（SPES-PDDA-αG）;最后,对αG酶组装层进行戊二醛交联处理或第二层PDDA组装,分别得到两种类型的固定化酶薄膜,记为SPES-PDDA-αG-GA和SPES-PDDA-αG-PDDA。当聚醚砜（PES）磺化度为28.6%,酶质量浓度为1.5g/L,固定化时间为16h时,载酶量达到最大值。研究酶的固定化位置（最外层或中间层）对固定化酶活性和稳定性的影响发现：酶位于组装层的最外层具有更高的酶活,而酶位于中间层时则表现出更高的稳定性。其中SPESPDDA-αG-GA酶膜在较苛刻条件下仍可保持68%的相对酶活力,储存40d后仍可维持90%的相对酶活。