HL-5抑制HCT116细胞增殖作用及作用机制

摘要

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)/磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)双靶点抑制剂HL-5对肿瘤细胞增殖的抑制作用和作用机制。方法选取部分实体瘤细胞株,测定HL-5与阳性药物HDAC靶点抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、PI3K靶点抑制剂4-羟基-2,6-二甲基苯甲腈(GDC-0941)的半数抑制率(IC_(50)),评价HL-5,SAHA,GDC-0941对肿瘤细胞增殖的抑制效果;同时,采用细胞克隆形成实验考察对肿瘤细胞的杀伤能力;通过碘化丙啶(PI)染色和流式细胞仪考察HL-5对细胞周期的影响;采用蛋白免疫印迹(Westernbloting)法检测细胞周期阻滞标志分子p-H3,P21,p-cdc2(161),cdc25c的表达水平。结果HL-5对多株肿瘤细胞的IC_(50)均小于0.5μmol/L,且均优于阳性药物SAHA和GDC-0941(P<0.05);25,50,100,200,400 nmol/LHL-5对人结肠癌细胞系HCT116细胞克隆形成有很好的抑制效果(P<0.01),且呈现一定的剂量依赖关系;HL-5处理后,p-H3和P21水平升高,p-cdc2(161)和cdc25c水平降低,HCT116细胞周期阻滞在G_(2)/M期。结论HL-5具有广谱抗肿瘤细胞增殖效果,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞克隆形成和阻滞细胞周期有关。