胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共转染神经干细胞实验研究

摘要

目的 探讨神经干细胞转染的新方法,并观察转染后目的 基因的表达情况.方法 原代培养神经干细胞,运用jet PEI转染试剂将目的 基因胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和内皮素B受体基因(EDNRB基因)共转染至神经干细胞内,免疫荧光显微镜观察、流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,测定转染效率,RT-PCR检测目的 基因表达情况.结果 成功培养出可用于基因转染的神经干细胞,转染后24h即可在免疫荧光显微镜下观察到GFP表达,流式细胞仪显示24、48和72 h转染效率分别为15.36%、24.67%和25.73%.RT-PCR显示目的 基因在神经干细胞内成功表达.结论 运用iet PEI成功将目的 基因转染至神经干细胞内,为相关神经变性痍病的基因治疗打下了实验基础.