通过电穿孔法用血凝素蛋白DNA疫苗对小鼠进行单独免疫可以诱导其产生针对H5N1亚型禽流感病毒的早期保护

摘要

试验背景:研制一种疫苗使人类免受H5N1亚型禽流感病毒的感染是一项迫在眉睫的任务。DNA疫苗是传统疫苗的替代品,可以预防新的H5N1亚型禽流感病毒的出现。在本试验中,笔者对用表达H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的质粒DNA进行单独免疫时在感染早期是否可以使小鼠模型抵抗致死攻击进行了评估。试验方法:在对小鼠进行致死攻毒前的第3、5、7天用HA疫苗分别单独免疫1次。小鼠的存活率、肺中病毒的滴度及体重的变化作为评估疫苗保护力的指标。在免疫后的不同天数,摘除小鼠眼球收集血清并通过ELISA和HI试验对特异性抗体进行检测,用以测定HA DNA疫苗介导的体液免疫反应。免疫后分离脾细胞,通过ELISPOT试验测定抗原特异性T细胞反应。试验结果:攻毒试验结果表明,用H5N1亚型禽流感病毒HA DNA疫苗进行单独免疫可以产生针对同型致死病毒量的有效的早期保护。免疫学分析显示,在免疫后的短时间内小鼠体内可以产生具有抗原特异性的抗体及T细胞反应。疫苗的保护能力取决于所注射的DNA的量及免疫后的持续时间。结论:与电穿孔法相结合,用100μg H5N1亚型禽流感病毒HA DNA疫苗对小鼠进行单独免疫能够在同型病毒感染的早期产生保护力。