北京鸭Mx基因克隆及其在鸭呼肠孤病毒感染的鸭胚成纤维细胞中的表达分析

摘要

本试验旨在研究北京鸭Mx基因的结构及功能.利用干扰素诱导剂Poly(I:C)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF),提取细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增北京鸭Mx基因全长编码区序列,并观察其在感染了鸭呼肠孤病毒(DRV)的DEF中的动态表达情况.北京鸭Mx基因序列分析结果显示,该基因编码区全长2 166 bp,编码721个氨基酸残基.通过与GenBank中已登录的脊椎动物Mx基因进行核苷酸系统进化树分析,结果显示北京鸭Mx基因与野鸭Mx基因关系最近.北京鸭Mx序列与其他动物基因序列的比对结果显示,核苷酸同源性为47.8％～99.8％,氨基酸同源性为47.9％～99.4％.DRV孵育DEF后,Mx呈波动性表达.结果表明,本试验成功克隆了北京鸭Mx基因,预测分析证实其编码的蛋白具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征,北京鸭Mx蛋白全基因的获得为下一步研究禽类Mx蛋白的抗病毒活性、作用机制及干扰素的监测奠定了基础.