葡萄糖-6-磷酸功能化亲水磁探针:有效分离富集糖肽/磷酸肽的双用途亲和材料

摘要

在Fe3O4磁芯上通过逐层修饰构建了葡萄糖-6-磷酸(G6P)功能化亲水磁探针Fe3O4@PDA@TiO2@G6P.聚多巴胺(PDA)可以作为偶联连接剂进一步接枝二氧化钛(TiO2);接枝的TiO2除作为G6P的锚定位点外,还可通过金属氧化物亲和层析技术有效富集磷酸肽;G6P的官能化赋予了纳米球高亲水性的表面,并利用亲水作用液相色谱法实现了糖肽的捕捉.实验结果表明,探针对糖肽具有低的检出限(0.1 fmol/μL)、高的选择性[m(HRP):m(BSA)=1:1000]、良好的重复性(10次循环)和高的负载量(300 mg/g);对磷酸肽具有低的检出限(0.02 fmol/μL)和高的选择性[n(β-casein):n(BSA)=1:1000).此外,这种双用途亲和材料具有同时富集糖肽和磷酸肽的能力,可从人唾液中鉴定出34个糖肽和36个磷酸肽,表明其在多种翻译后修饰的蛋白质组学分析中具有巨大的应用前景.