Jagged-1抑制小鼠胚胎干细胞分化为造血干/祖细胞

摘要

目的 探讨Notch信号通路在小鼠胚胎干细胞(ESC)分化为造血干/祖细胞(HSC/HPC)中的作用.方法1)体外培养小鼠拟胚体细胞(EBs),使用Jagged-1蛋白活化Notch信号通路及DAPT(γ-分泌酶抑制剂)抑制Notch信号通路.实验分为拟胚体细胞复苏组(EB组)、对照组、Jagged-1组、DAPT组和Jagged-1-DAPT组.2)流式细胞计量术检测ESC特异性表型和HSC/HPC特异性表型的表达.3)实时定量PCR检测各组Notch信号通路基因、小鼠ESC表型基因和HSC/HPC表型基因的表达.结果1)Jagged-1组细胞胚胎干细胞数较对照组和Jagged-1-DAPT组明显增多(P<0.05),2)Jagged-1-DAPT组分化的HSC/HPC数较control组及Jagged-1组明显增多(P<0.05);3)Jagged-1组Notch1、Notch2、Notch4 mRNA表达量较对照组明显升高(P<0.05);4)DAPT组和Jagged-1-DAPT组中Notch1、Notch4 mRNA表达量较对照组降低(P<0.05).结论Jagged-1激活Notch信号通路可抑制小鼠ESC向HSC/HPC的分化.