九江地区手足口病病原柯萨奇A6病毒的分离、鉴定及分子流行病学特征

摘要

目的 探讨九江地区流行手足口病病( HFMD)原体柯萨奇A6( CVA6)的分离、鉴定及分子流行特征.方法取手足口病患儿的咽拭子,将咽拭子病毒悬液接种于人横纹肌肉瘤细胞( RD细胞).通过CVA6病毒致细胞病变效应(CPE)分析、MTT法检测病毒增殖效果、CVA6病毒特异性核酸聚合酶链反应(PCR)及同源和遗传进化分析等方法检测CVA6的致病效果和分子流行特征.结果 咽拭子病毒悬液接种RD细胞盲传5代后出现CPE,收集其病毒培养基上清,再接种RD细胞2次,均出现CPE视为CPE阳性;CVA6病毒VP1区域通过序列比对,以此确认2株病毒为CVA6,分别命名JJ2012037和JJ2012039;CVA6呈时间依赖性抑制宿主细胞增殖;利用CVA6毒株的VP1序列和国内外流行的CVA6序列进行核苷酸同源性分析;该毒株与上海分离到CVA6( JX495144)序列发生的同源性最高(99. 2%~99. 6%).结论 成功分离出2株九江地区流行的手足口病病原CVA6病毒株,这2株CVA6分离株的分子流行特征接近上海地区的CVA6的流行病原,可能为同一个基因亚型.