抑制miR-327表达的重组腺病毒载体的构建及鉴定

摘要

目的:构建并鉴定可稳定抑制miR-327表达的重组腺病毒载体.方法:根据miR-327成熟体反向互补序列,合成寡核苷酸链,构建抑制miR-327表达的质粒载体,并对阳性克隆子进行测序鉴定.miR-327 shRNA重组质粒载体经包装、扩增、纯化获得miR-327 shRNA重组腺病毒,测定滴度.结果:获得最终滴度为1×1011 PFU/mL的大鼠miR-327 shRNA重组腺病毒载体.结论:成功构建具备一定滴度的大鼠miR-327 shRNA重组腺病毒载体,为后期揭示miR-327在心血管疾病中的作用及机制提供了基础.