桑黄酮G对缺血性中风大鼠血脑屏障的保护作用

摘要

目的 探讨桑黄酮G(kuwanon G,KG)对缺血性中风大鼠脑水肿和血脑屏障(BBB)的影响.方法 2018年10月至2019年9月选取45只250～300 g SPF级雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组、缺血性中风模型组(模型组)和治疗组,利用单侧大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAo)模型,术前3 d假手术组、模型组给予无菌水灌服,治疗组给予KG灌服,术后连续灌服7 d,通过神经功能评分检测各组大鼠的脑损伤程度,利用检测大脑含水量评估各组大鼠脑水肿程度,利用蛋白质印迹法(western blotting)检测各组大鼠脑组织中胞质紧密粘连蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、闭合蛋白(oc?cludin)、紧密连接蛋白(claudin-5)和基质金属蛋白-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)蛋白的表达.结果 与假手术组相比[6 h(0.30±0.48)、1 d(0.30±0.48)、3 d(0.30±0.48)、7 d(0.30±0.48),模型组(6 h(15.20±1.14)、1 d(14.60±1.17)、3 d(15.50±0.85)、7 d(15.60±1.08)]神经功能明显受损;治疗组[6 h(14.80±1.03)、1 d(13.20±1.03)、3 d(12.10±1.2)、7 d(9.40±1.27)]神经功能虽受损,但经桑黄酮G治疗后神经功能显著恢复,在第7天尤为显著(P<0.001).与假手术组[1 d(73.83±0.91)％、2 d(73.89±0.82)％、3 d(73.89±0.82)％、7 d(74.97±0.38)％]相比,模型组[1 d(81.71±1.12)％、2 d(84.98±0.39)％、3 d(83.54±0.84)％、7 d(80.84±1.22)％]脑水肿明显,在术后2天脑水肿最严重;治疗组[1 d(76.85±2.41)％、2 d(77.81±1.69)％、3 d(76.87±1.97)％、7 d(76.55±1.27)％]脑水肿亦明显,但经治疗后脑水肿明显减轻(P<0.001).相比假手术组ZO-1(0.52±0.15)、Occludin(0.52±0.15)、Claudin-5(0.89±0.06)、MMP-9(0.42±0.02),模型组ZO-1(0.21±0.05)、Occludin(0.38±0.07)、Claudin-5(0.41±0.07)蛋白的表达明显下降,MMP-9(0.86±0.14)显著上升;经桑黄酮G治疗后ZO-1(0.51±0.10)、Occludin(0.89±0.04)、Claudin-5(0.75±0.04)的表达明显上升,而MMP-9(0.28±0.06)的表达显著减少(P<0.001).结论 KG通过调节MCAo大鼠紧密连接蛋白和基质金属蛋白的表达,保护BBB完整性,从而发挥神经保护作用.