干扰长链非编码RNA CCAT2对膀胱癌细胞J82线粒体功能和肿瘤干细胞样特性的影响

摘要

目的 探讨干扰长链非编码RNA CCAT2(lncRNA CCAT2)对膀胱癌细胞J82线粒体功能、肿瘤干细胞样特性的影响.方法 通过构建lncRNA CCAT2短发卡RNA(shR-NA)干扰CCAT2表达,RT-PCR验证并选择其中CCAT2表达量最低的J82细胞系用于后续实验.克隆形成检测细胞增殖、流式细胞仪检测线粒体膜电位变化情况,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白水平,显微下观察肿瘤细胞成球情况,流式细胞仪检测各组细胞CD133的表达,Western blot检测OCT4、SOX2、CD44水平.结果 三种CCAT2-shRNA J82细胞系中的CCAT2表达量均低于shRNA-NC(P<0.05);CCAT2-shRNA组克隆形成率、c-Myc水平、肿瘤成球直径及成球率、CD133阳性细胞数、OCT4、SOX2、CD44水平低于shRNA-NC组(P<0.05),绿色荧光强度、Bax/Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9水平均高于shRNA-NC组(P<0.05).结论 下调lncRNA CCAT2表达量可以抑制J82细胞生长,可能与影响细胞线粒体功能以及肿瘤干细胞样特性有关.