糖化酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达

摘要

以穿酸质粒ｐＬＣ１为载体，大肠杆菌Ｃ６００为受体构建了扣囊拟内孢霉Ｓａｕ３４基因文库。从基因文库中提取重组质粒ＤＮＡ，转化酿酒酵母ＢＪ１９９１，选出具有粉水解酶活性的转化子，它含有编码扣囊拟内孢霉胞外糖化酶的基因片段，能发酵淀粉。琼脂糖凝胶电泳证明所插入ＤＮＡ片段为５．３ｋｂ，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得糖化酶的分子量为５４０００。酶活最适温度为５０℃，最适ｐＨ为５．５。