31株苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因型鉴定及表达产物研究

摘要

利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR-RFLP鉴定体系,鉴定了31株Bt菌株的cry基因类型,并进行了SDS-PAGE分析和杀虫生物活性测定.研究表明:25株含cry1基因,表达蛋白130～150kD;其中16株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活性的cry1I基因,其表达蛋白为81kD;15株同时含有cry1和cry2基因(13株表达蛋白约为60kD);10株含有未知待定基因;6株不含所鉴定的cry基因(其中2株有表达产物).室内生物测定表明:cry1、cry2基因表达的菌株对鳞翅目害虫具有高杀虫活性,7株对舞毒蛾和膜翅目--杨叶蜂幼虫具有较高杀虫活性;含有cry1Aa、cry1Ac、cry2或cry1A6、cry1Ac、cry2基因组合的菌株对棉铃虫幼虫均显示杀虫活性,其中6、12、30号菌株毒力最强.不含上述cry基因的菌株均无杀虫活性.以上结果证明,通过cry基因类型鉴定和表达产物的SDS-PAGE分析可以预测菌株的杀虫活性.