硒对亚硝酸钠导致的草鱼肝细胞氧化损伤的保护作用

摘要

以草鱼(Ctenopharyngodon idella)肝细胞(L8824)为研究对象,设置对照组、亚硝酸钠暴露实验组、亚硒酸钠孵育实验组和亚硒酸钠孵育后亚硝酸钠暴露实验组,探讨亚硒酸钠对不同浓度亚硝酸钠诱导L8824细胞氧化损伤及凋亡的保护作用.结果 显示,亚硝酸钠暴露能抑制L8824细胞贴壁,导致细胞凋亡率增加.亚硝酸钠暴露引致L8824细胞的谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性降低;gpx、sod和cat基因表达下调(P＜0.05),DNA损伤诱导转录物3(ddit3)和bcl-2相关X蛋白(bax)基因表达上调(P＜0.05).亚硒酸钠(10μmol/L)孵育L8824对细胞形态和凋亡率无显著影响,但GPX、SOD和CAT活性上升,gpx、sod、cat、核因子E2相关因子2(Nrf2)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(keap1)基因表达上调(P＜0.05).亚硒酸钠孵育后亚硝酸钠暴露实验组,细胞凋亡率、GPX、SOD和CAT活性较对照组无显著变化,但B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)基因表达显著上调(P＜0.05).研究结果表明,给草鱼肝细胞补充硒在一定程度上能缓解亚硝酸钠暴露导致的抗氧化系统失衡,抵抗亚硝酸钠暴露带来的氧化应激,降低细胞凋亡率,硒的预孵育作用能上调Nrf2/Keap1通路中的关键基因和酶,表明硒的保护作用可能是通过介导Nrf2/Keap1信号通路发挥作用.