饥饿胁迫下家蚕5龄起蚕中的蛋白表达谱及BmLp-c6的转录分析

摘要

[目的]分析家蚕Bombyx mori受饥饿胁迫后的蛋白质谱变化,探索其耐受饥饿的机理.[方法]以家蚕品种932为实验材料,利用双向电泳和质谱技术检测5龄起蚕经过24 h饥饿胁迫的蛋白质谱差异变化,利用荧光定量PCR技术分析BmLp-c6的转录表达.[结果]经比对饥饿蚕和正常取食蚕的血淋巴蛋白谱,饥饿蚕有62个特异蛋白点.蛋白点的等电点在4.22 ～6.98之间,分子量分布在20.81 ～144.69 kDa间.选取只在饥饿时出现的特异蛋白点No.7111进行质谱鉴定,根据其氨基酸序列进行引物设计,获得了目的基因BmLp-c6,经与载体pET-21d(+)连接重组后,成功获得诱导表达.经实时荧光定量PCR分析,当5龄起蚕受到饥饿胁迫影响时,BmLp-c6基因在血淋巴中大量转录表达,但在中肠中的转录表达水平却极低.[结论]家蚕5龄起蚕在饥饿胁迫下,血淋巴中的蛋白质谱发生变化,BmLp-c6会大量转录表达.