一株野生竹黄菌的鉴定及其萃取发酵产竹红菌甲素发酵条件的优化

摘要

cqvip:通过内转录间隔区测序和序列比对的方法,对1株高产竹红菌甲素(hypocrellin A,HA)的菌株进行分子鉴定;以HA得率为目标,对种子液培养时间、接种量以及发酵产HA的培养基碳氮源进行优化,并对萃取发酵的表面活性剂种类、添加量和时间进行筛选和优化。通过形态和荧光染色观察,研究菌丝体形态、细胞膜成分和活性氧分布对萃取发酵的响应。结果表明:该菌株属于竹黄菌,命名为Shiraia bambusicola(GDMCC 60438)。在实验范围内,以10 g·L^-1甘油、4 g·L^-1马铃薯浸出粉和12 g·L^-1牛肉膏为培养基,经72 h液态发酵,单位碳源HA生物转化率(得率)达到13.98 mg·g^-1。在1%~10%(V∶V)范围内,增加接种量可以提升HA得率。Triton X-100为萃取发酵的优选表面活性剂。与常规发酵相比,在第70小时添加0.2%(V∶V)Triton X-100启动萃取发酵,HA的得率提高37.02%,达到了16.70 mg·g^-1碳源。萃取发酵时,菌丝表面发生褶皱,呈现收缩或聚集状态;菌丝体内活性氧得到诱导。