香樟酪氨酸酶对NAA诱导的响应及其生化性质研究

摘要

以离体香樟叶片和果实为材料,研究了萘乙酸(NAA)处理对其中酪氨酸酶及其同工酶活性的影响,并对香樟果实中酪氨酸酶进行分离纯化,初步分析了该酶基本生化特征.结果表明:(1)10μmol·L-1 NAA处理对香樟叶片同工酶TYR L2有较强的激活作用,对同工酶TYR L1有抑制作用,1.0和0.1μmol·L-1浓度的NAA对同工酶TYR L3有激活作用;(2)在香樟果实的酪氨酸酶同工酶中,TYR F1的活性最高并在果实成熟过程中逐渐增强,100μmol·L-1的NAA对果实成熟以及酪氨酸酶的酶活性都有一定的促进作用;(3)经纯化的香樟果实酪氨酸酶最适pH值为7.5,最适温度为50℃,亚基分子量为43 Kda;以L-DOPA为底物时的Km为12.82 mmol·L-1,Vmax为80.65 U·mg-1蛋白;其在酸性(pH 4～7)和高温(40～70℃)条件下较稳定.可见,不同浓度的NAA对香樟叶片和果实中的酪氨酸酶活性有不同程度的激活和抑制作用.