云南曲靖妇女生殖道人乳头瘤病毒感染和宫颈细胞学异常的现状调查及相关基因甲基化研究

摘要

研究背景：
　　 宫颈癌(Cervical cancer)是女性第二大常见恶性肿瘤，现已明确人乳头瘤病毒（Human pa pillomavirus，HPV）感染是宫颈癌发生的根本原因。本研究的目的是调查云南曲靖普通妇女HPV感染率及相关危险因素、宫颈细胞学异常率及相关危险因素，以及相关基因在各级细胞学中的甲基化状态。
　　 研究方法：
　　 采用横断面研究方法对曲靖市5936名女性常住人口进行调查。对目标人群进行包括人口信息、行为信息和婚育状况等内容的流行病学问卷调查，采集宫颈脱落细胞标本应用快速导流杂交基因芯片技术进行HPVDNA分型检测，并对宫颈液基细胞进行细胞病理诊断。采用病例对照研究方法，应用甲基化特异性聚合酶链反应法联合变性高效液相色谱分析法对细胞学异常和正常妇女的细胞学样本进行MGMT、RARβ2、DAPK1基因启动子区的甲基化检测。定量资料的比较采用卡方检验，影响因素分析采用单因素和多因素非条件Logistic回归分析。
　　 研究结果：
　　 在5936名被调查妇女中，高危型HPVDNA阳性率为8.3％，高危型HPV感染率有两个高峰，分别为18～24岁(11.5%)和50～55岁(11.2%)。在412例高危型HPV分型检测阳性妇女中，最常见感染亚型为HPV-16(3.4%)，其次为HPV-56(1.7%)、HPV-58(1.4%)、HPV-33(1.2%)和HPV-52(0.88%)。高危型HPV复合感染率在整个被调查人群中为3.5%，最常见的复合感染类型为HPV-16和HPV-56。多因素非条件Logistic回归分析显示50-65岁、已婚是HPV感染的保护因素。
　　 在被调查妇女中，细胞学异常的总体患病率为5.8%，细胞学异常率在35-39岁年龄段最高，为7.3%。妇女患HSIL和LSIL的风险在HPV-33感染时最高(OR60.64，CI18.40-199.87;OR381.06，CI68.88-2108.02)，其次为HPV-58感染。HPV复合感染使妇女患HSIL的风险较单一感染时升高(OR699.11，CI190.30-2568.32vs.OR196.35．CI59.00-653.33)。多因素非条件Logistic回归分析显示，HPV感染、吸烟、滴虫感染、50～54岁是宫颈细胞学异常的危险因素，而35～39岁是宫颈细胞学异常的保护因素。
　　 在相关基因启动子区甲基化的病例对照研究中，细胞学正常妇女MGMT、RARβ2、DAPK1各基因甲基化率分别为36.9%、42.0%和46.7%，任一基因甲基化频率随年龄增长有上升趋势(x2=10.7345，p=0.0133)。MGMT、RARβ2基因甲基化频率在各级细胞学之间有显著差异(x2=6.8976，p=0.0086;x2=33.2477，p＜0.0001)，随细胞学病变程度加重，基因甲基化的数量增加（r=0.1178，p=0.0026）。MGMT、RARβ2.DAPK1基因启动子区甲基化与HPV感染无关，单因素分析显示各基因及任一基因甲基化是细胞学异常可能的危险因素。LSIL患者中，DAPK1基因甲基化率在病理正常者显著高于CIN1，MGMT单一基因甲基化诊断宫颈上皮内高度病变的灵敏度为75%，特异度为60%。
　　 结论：
　　 曲靖市妇女高危型HPV感染率为8.3%，高危型HPV感染率的两个高峰分别为18-24岁和55-59岁，以HPV-16型最常见，HPV复合感染率为3.5%，最常见的复合感染类型为HPV-16和56,50～65岁、已婚是HPV感染的保护因素。
　　 该地区妇女宫颈细胞学异常的患病率为5.8%，HPV感染是宫颈脱落细胞学异常的最强的危险因素，且HPV-33、HPV-58在我国妇女宫颈癌变过程中具有重要作用。应重视HPV复合感染，加强对生育期及围绝经期妇女宫颈病变的筛查。
　　 随细胞学病变程度加重，MGMT、RARβ2、DAPK1任一基因甲基化的数量有增加趋势，MGMT、RARβ2.DAPK1基因启动子区甲基化与HPV感染无关。LSIL中DAPK1基因启动子区甲基化在病理正常者显著高于CIN1，而MGMT单一基因甲基化诊断宫颈上皮高度病变具有比较高的灵敏度和特异度。
　　 本研究对妇女HPV感染特征及宫颈细胞学异常提供了重要资料，为我国HPV预防性疫苗的研究提供了参考。