离心运动诱导骨骼肌细胞微管损伤的机制及针刺干预研究

摘要

目的：观察离心运动对大鼠骨骼肌微管蛋白以及相关蛋白的影响，分析其对微管的调控作用；探讨离心运动对大鼠骨骼肌微管损伤的分子机制；观察针刺干预对离心运动后骨骼肌微管的影响，阐明其作用的机理。
　　方法：以雄性SD大鼠为研究对象。实验一分为单纯对照组和离心运动组（下坡跑，坡度-16°，速度16m/min，时间90min）；实验二分为单纯对照组、安慰剂组（腹腔注射30％DMSO的生理盐水）、单纯阻断组（腹腔注射SB203580，15mg/kg体重）、单纯运动组和阻断运动组；实验三分为单纯对照组、单纯针刺组（小腿三头肌纵向从远端斜刺，进针角度约30°，进针止于小腿三头肌肌腹处，留针2分钟）、单纯运动组和针刺运动组。各组又按时相点分为0h、12h、24h、48h和72h小组，大鼠在对应时间点取比目鱼肌进行检测。采用免疫印迹法检测α-tubulin和MAP4蛋白表达、Op18和p38蛋白表达及磷酸化表达情况，免疫共沉淀法检测MAP4和p38/MAPK之间的相互作用，免疫荧光组织化学（激光共聚焦法）观察和定量α-tubulin的分布和表达。
　　结果：（1）离心运动后大鼠骨骼肌比目鱼肌中的微管蛋白出现一过性的表达降低；MAP4蛋白出现一过性的升高，Op18蛋白表达及磷酸化均出现一过性的降低，但磷酸化表现更为明显。免疫荧光结果和蛋白表达结果一致。（2）使用p38特异性抑制剂SB203580结合离心运动后MAP4蛋白表达减少，Op18蛋白表达特别是其磷酸化表达增加，骨骼肌微管蛋白的解聚出现缓解；免疫共沉淀显示MAP4和p38/MAPK激酶之间有相互作用。（3）运动后针刺使骨骼肌微管蛋白α-tubulin表达上调，下调MAP4的蛋白表达及上调Op18磷酸化的表达，同时下调了p38蛋白及磷酸化表达。
　　结论：（1）离心运动诱导骨骼肌细胞微管损伤，其相关蛋白MAP4和Op18参与了这一过程的调控。（2）离心运动激活p38激酶，导致MAP4蛋白增加、Op18蛋白减少，二者协同调控引起微管结构的改变。（3）运动后针刺可以缓解骨骼肌微管的损伤，主要是通过下调p38蛋白及磷酸化表达，使其下游蛋白协同调节而发挥作用。

目录

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目录

中英文缩略词对照表

1 前言

1.1 选题依据

1.2 研究内容

1.3 研究假设

1.4 技术路线

2 文献综述

2.1 细胞骨架概述

2.2 运动对骨骼肌骨架蛋白的影响

2.3 微管的结构和功能

2.4 MAPK信号通路和微管蛋白的关联

2.5 针刺干预对骨骼肌微损伤的影响

3 研究一 离心运动对大鼠骨骼肌微管及相关蛋白的影响

3.1 引言

3.2 材料与方法

3.3 研究结果

3.4 分析与讨论

3.5 小结

4 研究二 离心运动对大鼠骨骼肌微管损伤的机制研究

4.1 引言

4.2 材料与方法

4.3 研究结果

4.4 分析与讨论

4.5 小结

5 研究三 针刺干预对大鼠骨骼肌微管损伤恢复的研究

5.1 前言

5.2 材料与方法

5.3 研究结果

5.4 分析与讨论

5.5 小结

6 全文总结

致谢

参考文献

个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果