人双特异性磷酸酶VHR与细胞周期相关重要转录因子E2F1的DNA结合结构域的结构与功能研究

摘要

真核生物的基因在大肠杆菌中的高效表达是蛋白质功能研究,结构生物学研究,以及生物技术制药的重要环节.自1974年首次实现真核生物的基因在大肠杆菌中的表达以来,虽然已积累了大量的信息,但基因表达在相当程度上仍然是以经验为根据的.因为每一个特定的基因及其所编码的蛋白质,都给予人们独一无二的挑战.在过去几年中,我共尝试了26个基因在大肠秆菌中的表达.有成功也有失败,在论文第一章根据文献,也根据作者在实际工作中积累的经验概述了影响外源基因在大肠杆菌中表达的基本因素.这些因素主要包括:靶基因上游的启动子、靶基因中的稀有密码子、细胞内的蛋白质折叠、融合表达、宿主菌株及其培养条件等.

目录

文摘

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第一章综述：外源基因在大肠杆菌中的表达

1.启动子对表达的影响

2.稀有密码子对表达的影响

3.质粒指导的表达与染色体指导的表达

4.宿主菌株对表达的影响

5.培养条件对表达的影响

6.蛋白质在细胞内的折叠对表达的影响

7.使蛋白质进入周质空间或培养基

8.融合表达

9.结语

参考文献

第二章蛋白质酪氨酸磷酸酶

第一部分综述：蛋白质酪氨酸磷酸酶的结构、功能、底物专一性和抑制剂研究进展

1.简介

2.蛋白质酪氨酸磷酸酶的结构和功能

3.蛋白质酪氨酸磷酸酶的底物专一性

4.蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制剂的筛选

第二部分人双特异性磷酸酶VHR中保守氨基酸残基的结构和功能意义的研究与VHR抑制剂的研究

一、引言

二、稳态动力学

三、材料和方法

四、结果和讨论

参考文献

第三章细胞周期相关重要转录因子E2F

第一部分综述：在E2F生物学功能研究方面的进展

1.E2F的发现和它与癌症的关联

2.E2F家族转录因子

3.转录‘激活性’E2Fs

4.‘抑制性’E2Fs

5.E2F6

第二部分人E2F1DNA结合结构域的克隆、表达纯化及结构和功能研究

一、引言

二、材料和方法

三、结果和讨论

参考文献

本论文工作的主要创新点

致谢

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