声明
摘要
缩略词表
第一章绪论
1．1．1丁二酸概述
1．1．2丁二酸的产业化进展
1．1．3丁二酸的生物合成途径
1．2解脂耶氏酵母
1．2．1解脂耶氏酵母概述
1．2．2解脂耶氏酵母代谢工程生产丁二酸的研究进展
1．3羧酸转运蛋白及其工程化改造
1．3．1单羧酸转运蛋白
1．3．3二羧酸转运蛋白
1．3．4线粒体羧酸转运载体
1．3．5羧酸转运蛋白在代谢工程中的应用
1．4本论文的研究内容、目的及意义
1．4．1研究内容
1．4．2研究目的
1．4．3研究意义
第二章解脂耶氏酵母丁二酸转运蛋白的筛选和鉴定
2．1实验材料
2．1．1菌株和质粒
2．1．2寡核苷酸序列
2．1．3常用工具酶
2．1．4常用试剂盒
2．1．5常用生化试剂
2．1．6仪器设备
2．1．7常用培养基配方
2．1．8常用试剂及缓冲液配方
2．2实验方法
2．2．1菌种保藏方法
2．2．2PCR扩增
2．2．3分子克隆技术
2．2．4大肠杆菌化学感受态细胞制备
2．2．5解脂耶氏酵母醋酸锂转化方法
2．2．6酵母菌落PCR
2．2．7酵母基因组提取方法
2．2．8解脂耶氏酵母工程菌株生产丁二酸的发酵方法
2．3结果与讨论
2．3．1鉴定解脂耶氏酵母中线粒体丁二酸转运蛋白
2．3．2筛选增强丁二酸的分泌的C4-二羧酸转运蛋白
2．4本章小结
第三章高产丁二酸解脂耶氏酵母底盘细胞的构建
3．1实验材料
3．1．1菌株和质粒
3．1．2寡核苷酸序列
3．2实验方法
3．2．1解脂耶氏酵母分批补料发酵方法
3．2．2细胞浓度、胞外有机酸和葡萄糖的检测方法
3．3结果与讨论
3．3．1优化丁二酸的生物合成途径
3．3．2SpMae1对于细胞生长和丁二酸生产的影响
3．3．3丁二酸高产菌株PGC62-SYF-Mae的分批补料发酵
3．4本章小结
全文总结
创新性成果与展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文
山东大学;
