卡路里限制对小鼠能量代谢和脂肪组织中免疫细胞分布影响的初步研究

摘要

随着经济水平的提高、生活方式和营养结构的改变，全球的超重肥胖正在以令人担忧的速度发展。肥胖引诱大量的免疫细胞浸润和分泌各种促炎性的细胞因子，所以肥胖又是一种低度的慢性炎性病。越多越多的科研工作者将目光投向于饮食干预的方式减肥，而卡路里限制就是饮食干预的方式之一。研究表明，卡路里限制在延长寿命、调节炎性和生物节律等方面都发挥着重要作用，但对于卡路里限制对小鼠脂代谢影响的了解还知之甚少。在此，设置低脂和高脂饲料分别构建卡路里限制的小鼠模型，分析小鼠在不同百分比和不同时程卡路里限制下，脂肪组织代谢和免疫细胞分布的改变，研究卡路里限制下，免疫细胞随着脂代谢的变化规律。
　　卡路里限制的研究结果表明:1.24h转轮实验发现，卡路里限制后小鼠白天的活动明显增强。2.小鼠直肠温度的测定发现，低脂组随着卡路里限制程度加深，体温的降低明显，而高脂组体温相对平缓。3.对脂肪组织称重、组化染色和western blot分析发现，卡路里限制促进小鼠皮下和附睾脂肪重量的降低，促进血管化和棕色脂化加强。4.同时，发现在低脂卡路里限制过程中，皮下脂肪和附睾脂肪的肥大细胞和巨噬细胞伴随着限制程度的加深持续上升，而高脂卡路里限制下，皮下和附睾脂肪中的肥大细胞和巨噬细胞在10％卡路里限制下呈下降趋势，20％CR和40％CR下肥大细胞和巨噬细胞上升。
　　综上所述，本文通过卡路里限制模型的构建，研究了卡路里限制所引起的小鼠生理特性（体温、活动和摄食速率）、白色脂肪棕脂化和免疫细胞（肥大细胞和巨噬细胞）分布的变化规律，为进一步的机制研究奠定了基础。

目录

声明

致谢

摘要

第一章 前言

1．1 肥胖

1．1．1 肥胖的概述

1．1．2 肥胖相关疾病

1．2 肥胖引发脂肪组织炎性

1．2．1 脂肪组织免疫细胞的浸润

1．2．2 免疫细胞及其因子

1．3 肥胖的治疗

1．4 卡路里限制促进减肥

1．4．1 卡路里限制的研究历程

1．4．2 卡路里限制改善肥胖和炎性

1．5 本课题开展的依据及意义

1．6 本课题拟要解决的科学问题

第二章 材料与方法

2．1 主要试剂

2．3．1 饲料配制

2．3．2 小鼠饲养与饮食

2．3．3 组织脱水包埋和切片

2．3．4 组织HE染色

2．3．5 组织甲苯胺蓝染色

2．3．7 巨噬细胞Mac-2免疫组化

2．3．8 血管化CD31免疫组化

2．3．9 夜间摄食速率的测定

2．3．10 组织总蛋白的提取

2．3．11 Western blot

2．4 统计方法

第三章 结果与分析

3．1 卡路里限制模型的构建

3．1．1 三周不同百分比卡路里限制

3．1．2 不同时程卡路里限制

3．2 卡路路里限制重塑小鼠的生理特性

3．2．1 卡路里限制降低小鼠体温

3．2．2 不同百分比卡路里限制改变小鼠昼夜活动

3．2．3 不同百分比卡路里限制改变小鼠昼夜摄食速率

3．3 不同百分比卡路里限制改善小鼠葡萄糖耐受和胰岛素敏感

3．4 卡路里限制促进脂肪组织代谢

3．4．1 卡路里限制引起脂肪组织和肝脏重量的降低

3．4．2 不同百分比卡路里限制引起小鼠脂肪组织更小的尺寸和多腔室的表型

3．4．3 卡路里限制引起小鼠脂肪组织血管化的改变

3．5 卡路里限制促进脂肪组织代谢

3．5．1 卡路里限制促进小鼠氧气消耗和二氧化碳产生

3．5．2 不同百分比卡路里限制促进小鼠脂肪组织棕脂化

3．6 免疫细胞动态响应卡路里限制过程

3．6．1 肥大细胞动态响应卡路里限制过程

3．6．2 巨噬细胞动态响应卡路里限制过程

第四章 结论与讨论

参考文献

攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况