自体骨髓源神经干细胞移植治疗中枢神经系统损伤的蛋白质组学分析

摘要

背景:战争创伤、交通意外、自然灾害以及脑血管意外都会造成大量神经系统损伤的患者,中枢神经系统损伤预后较差,常给患者留下难以恢复的症状如截瘫、偏瘫、失语、视力障碍等。给患者本人生活造成极大的困难,给患者家庭带来沉痛的负担。中枢神经系统损伤的治疗是神经外科的一大难点,目前常规药物以及物理疗法效果不尽如人意。自体骨髓源神经干细胞移植是治疗中枢神经系统损伤的一个新的思路,具有广阔的前景,但是目前神经干细胞移植治疗中枢神经系统损伤早期疗效不显著,不利于临床观察。而蛋白质组学的技术发展为解决此问题提供了一个新的方法,使用蛋白质组学技术分析脑脊髓损伤患者接受神经干细胞移植术前组、接受神经干细胞移植术后组、正常对照组以及假手术组患者脑脊液中的蛋白质组学的变化,进一步研究中枢神经系统损伤患者脑脊液的蛋白质组学,并期望以此来评价神经干细胞移植早期疗效。
　　目的:
　　1.初步探讨脑脊液蛋白质组学与神经功能的关系。
　　2.进一步研究中枢神经系统损伤的脑脊液蛋白质组学。
　　3.应用蛋白质组学的方法研究分析干细胞移植对中枢神经系统损伤的疗效。材料与方法:
　　一.收集正常成人40例(组1,n=40,114标记)、中枢神经系统损伤患者40例(组2,n=40,115标记)、以上患者术后一周时脑脊液(组3,n=40,116标记),以及神经干细胞培养上清液5ml(组4,117标记);二.正常成人40例(组1,n=40,114标记),假手术组40例术前、术后(组5,n=40,分别用114、115标记),组内等量混合后利用高效液相色谱柱去除高丰度蛋白,样本经iTRAQ试剂标记后利用二维色谱分离,经串联质谱鉴定以及相对定量,并从蛋白质数据库中检索蛋白质。
　　结果:
　　质谱得到的多肽片段,经谱库搜索鉴定的蛋白共59个,神经干细胞移植术前组与正常对照组存在差异的蛋白质有13个,其中有5个蛋白质呈高表达,8个呈低表达。以上13个蛋白质中有7个蛋白质在神经干细胞移植术后组与正常对照组表达无差异;假手术术前组表达与神经干细胞移植术前组无明显差异,假手术组术前术后无明显差异。
　　结论:蛋白质在神经系统的发生、转化过程中起到非常重要的作用,通过蛋白质组学的方法可以有效分析CSF中各种蛋白质的变化情况,为我们了解神经系统生理病理变化提供了一个非常重要的工具,可以发现神经系统微观、定性以及半定量的变化,为疾病的早期诊断以及疗效评价提供了基础。通过我们的研究发现自体骨髓源神经干细胞移植治疗中枢神经系统损伤的疗效比较肯定,是中枢神经系统损伤治疗的一个非常有前景的治疗方法。

目录

封面

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中英文缩略词

中文摘要

英文摘要

1.前言

2.材料与方法

2.2主要试剂

2.3 样品来源：

2.4分组情况及标本留取方法

2.5.实验方法

3.结果

3.1.样品色谱图

3.2.质谱结果

4.结果分析讨论：

4.1术前组与正常对照组差异蛋白功能以及其在CSF中变化的分析

4.2.术后组CSF中蛋白质表达变化

4.3假手术组蛋白质表达情况分析

5.结论

参考文献

附录

致谢

综述及参考文献