NGF和CgA调控RWPE-1细胞内钙离子浓度变化的实验研究

摘要

研究目的：慢性前列腺炎（CP）是泌尿外科及男科的常见病、多发病，其复发率高、治愈率低，严重影响男性患者的性功能和生殖功能。关于慢性前列腺炎病因学研究主要集中在病原学、上皮功能障碍及尿液返流等方面，该病的发病机制尚未明确。近年来，相关研究提示慢性前列腺炎的发生可能与细胞因子及前列腺神经内分泌功能改变等多种因素有关。本实验主要探讨神经生长因子（NGF）和嗜铬颗粒蛋白 A（C gA）等神经内分泌标志物处理后前列腺上皮细胞系 RWPE-1细胞内钙离子浓度（[Ca2+]i）的差异及其在慢性前列腺炎发病中可能起到的作用。
　　研究方法：不同浓度的NGF和CgA（50 ng/mL、200 ng/mL）刺激RWPE-1细胞，用激光共聚焦显微镜（LSCM）观察不同浓度的NGF和C gA刺激后细胞内[Ca2+]i变化，加入 TRP V1受体拮抗剂后继续观察细胞内[Ca2+]i变化。然后，将正常细胞外液换成D-PBS后，再加入NGF和C gA观察细胞内[Ca2+]i变化。
　　研究结果：50 ng/mL NGF和 C gA刺激细胞后，细胞内[Ca2+]i未见明显变化。200 ng/mL N GF和 CgA刺激细胞后，细胞内[Ca2+]i明显增加，加入 TRP V1受体拮抗剂后，细胞内[Ca2+]i未见明显变化。将正常细胞外液换成 D-PBS后，用 NGF和CgA刺激后，细胞内[Ca2+]i未见明显改变。
　　研究结论：NGF和CgA可引起细胞内[Ca2+]i增加，主要是依赖于TRPV1通道开放，触发细胞外Ca2+内流所致。由此可推测，CP的发生可能是通过分泌和释放NGF和CgA，引起前列腺上皮细胞膜TRPV1通道开放，触发细胞内[Ca2+]i增加，导致前列腺上皮细胞分泌功能下降和前列腺平滑肌细胞收缩，从而引起一系列慢性前列腺炎样症状。

目录

声明

英文缩写词表

1. 引言

2．实验材料与方法

2.1.1 主要试剂

2.1.2 主要仪器

2.1.3 实验相关试剂的成分和配制方法

2.2 实验方法

2.2.1 细胞培养

2.2.2 细胞计数

2.2.3 荧光染色

2.2.4 激光共聚焦显微镜系统

2.3 统计学处理

3 实验结果

3.1 50 ng/mL NGF和CgA对RWPE-1细胞内[Ca2+]i的影响

3.2 200 ng/mL NGF和CgA对RWPE-1细胞内[Ca2+]i的影响

4 讨论

5 结论

参考文献

附录个人简历

致谢

课题综述:神经内分泌因素在前列腺疾病中作用的研究进展